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酶法試劑盒實驗如何避免加樣產生氣泡呢?

  • 發布日期:2020-11-18      瀏覽次數:3943
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          通常氣泡都是聚集在酶法試劑盒酶標板的孔周圍,導致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內反應不均一。很多說明書、教科書上也都提到,加樣時要避免出現氣泡,這到底是什么原因呢?因為在做實驗的過程中,有時為了打干凈槍頭里面的液體,很容易產生氣泡,是不是這樣對實驗結果會后什么影響?

          1.通常氣泡都是聚集在酶標板的孔周圍,導致孔中液體不能與孔壁有效接觸,使孔內反應不均一。

          2.包被時有氣泡的話,將導致包被不*實際包被量下降-弱陽性甚至假陰性。

          3.封閉時有氣泡的話,將導致大量未結合位點的存在,引起非特異性結合-本底增高,假陽性。

          4.加樣時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結合-弱陽性甚至假陰性。

          5.加二抗時有氣泡的話,抗原抗體不能有效的結合-弱陽性甚至假陰性(競爭法相反-假陽性)。

          6.加顯色液時有氣泡的話-顯色不*。

          7.加終止液時有氣泡的話(1、不能*終止反應 2、影響酶標儀比色,OD值增高)

          8.洗滌時有氣泡的話,非特異性結合物不能*洗去,做無用功。

          避免方法:
          1.加樣時盡量靠近孔底(不要接觸孔底),用力均勻,不要過快過猛。

          2.封閉時一定要加滿孔。

          3.洗滌時一定要加滿孔(重要),氣泡會浮上來*終驅除。手工洗板時一定要吸干水分并用力拍干。
        
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