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7月盛夏“熱”點聚交之大鼠內(nèi)皮素1ELISA試劑盒

  • 發(fā)布日期:2014-07-11      瀏覽次數(shù):1529
    •       ELISA試劑盒是我們公司主營產(chǎn)品,種屬標(biāo)本齊全, 有人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,豬ELISA試劑盒,猴子ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒,雞ELISA試劑盒,魚ELISA試劑盒等等。有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;我們的試劑盒是美國RD進口分裝的,(國產(chǎn)跟*的都有)價格實惠且質(zhì)量保證,售前,售中,售后提供技術(shù)指導(dǎo),購買我們的試劑盒還可享受免費代測的服務(wù)。

      大鼠內(nèi)皮素1試劑盒說明書

      本試劑盒僅供研究使用。

      檢測范圍:                                                          

      8μg/L -200μg/L

       

      使用目的:

      本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中內(nèi)皮素1(ET-1)含量

      實驗原理

      本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)水平。用純化的大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)皮素1(ET-1),再與HRP標(biāo)記的內(nèi)皮素1(ET-1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)皮素1(ET-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)濃度。

      標(biāo)本要求

      1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

      2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

      操作步驟

      1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

      200μg/L

      5號標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      100μg/L

      4號標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      50μg/L l

      3號標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      25μg/L

      2號標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

      12.5μg/L

      1號標(biāo)準(zhǔn)品

      150μl2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

       

       

      1. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
      2. 溫育:用封板膜封板后置37溫育30分鐘。  
      3. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
      4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
      5. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
      6. 溫育:操作同3。
      7. 洗滌:操作同5。
      8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
      9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

      測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

      注意事項

      1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

      2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

      3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

      1. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
      2. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

      6.底物請避光保存。

      7.嚴(yán)格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

      8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

      9.本試劑不同批號組分不得混用。

      10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

      保存條件及有效期

      1.試劑盒保存:;2-8℃。

      2.有效期:6個月

            上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司生產(chǎn)經(jīng)營生物化學(xué)產(chǎn)品,主打產(chǎn)品包括酶聯(lián)免疫(elisa)試劑盒,重組蛋白,純化抗體,sigma化學(xué)試劑。經(jīng)過多年的市場經(jīng)營,我們的產(chǎn)品已經(jīng)推廣到各大科研單位及高等院校,深受客戶的信賴。歡迎新老客戶或進入公司訂貨,同時感謝廣大客戶對我司一如既往的支持與信任。

       

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