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請放心購買“人一氧化氮合成酶ELISA試劑盒”

  • 發布日期:2015-10-28      瀏覽次數:1303
    • 十年沉淀,參考信息日益完善,操作流程方便易學,在科研界奠定了堅實的實驗基礎。科研人員不斷潛心研發,讓參考數值越來越,減少實驗誤差。現貨供應,。滿足行業的不同需求,針對不同客戶的實驗要求制定不同的使用方案。隨著國內生物科研領域的發展,在未來的幾年ELISA試劑盒的需求會更多。

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      檢測范圍:  96T

      1μmol/L - 32μmol/L

      使用目的:

      本試劑用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中一氧化氮合成酶 (NOS)含量。實驗原理

      本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人一氧化氮合成酶 (NOS)水平。用純化的人一氧化氮合成酶(NOS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入一氧化氮合成酶(NOS),再與 HRP標記的一氧化氮合成酶 (NOS)抗體結合,形成抗體 -抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的一氧化氮合成酶(NOS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人一氧化氮合成酶(NOS)濃度。

      試劑盒組成

      1

      30倍濃縮洗滌液

      20ml×1瓶

      7

      終止液

      6ml×1瓶

      2

      酶標試劑

      6ml×1瓶

      8

      標準品( 64μmol/L)

      0.5ml×1瓶

      3

      酶標包被板

      12孔 × 8條

      9

      標準品稀釋液

      1.5ml×1瓶

      4

      樣品稀釋液

      6ml×1瓶

      10

      說明書

      1份

      5

      顯色劑 A液

      6ml×1瓶

      11

      封板膜

      2張

      6

      顯色劑 B液

      6ml×1/瓶

      12

      密封袋

      1個


      標本要求

      1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于 -20℃保存,但應避免反復凍融

      2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的( HRP)活性。操作步驟

      1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

      2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、

      待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

      3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 3 0分鐘。

      4.配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用

      5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此重復 5次,拍干。

      6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。

      7.溫育:操作同 3。

      8.洗滌:操作同 5。

      9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻, 37℃避光顯色15分鐘.

      10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

      11.測定:以空白空調零, 450nm波長依序測量各孔的吸光度( OD值)。測定應在加終止

      32μmol/L

      5號標準品

      150μl的原倍標準品加入 150μl標準品稀釋液

      16μmol/L

      4號標準品

      150μl的 5號標準品加入 150μl標準品稀釋液

      8μmol/L

      3號標準品

      150μl的 4號標準品加入 150μl標準品稀釋液

      4μmol/L

      2號標準品

      150μl的 3號標準品加入 150μl標準品稀釋液

      2μmol/L

      1號標準品

      150μl的 2號標準品加入 150μl標準品稀釋液

      液后 15分鐘以內進行。操作程序總結:

      計算

      以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的 OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

      注意事項

      1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

      2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

      3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

      4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本 OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數( n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

      5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

      6.底物請避光保存。

      7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準 .

      8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

      9.本試劑不同批號組分不得混用。 10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。保存條件及有效期

      1.試劑盒保存:;2-8℃。

      2.有效期: 6個月

      標本收集方法:
      1. 血清:
      室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
      2. 血漿:
      應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
      3. 尿液:
      用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
      4. 細胞培養上清:
      檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
      5. 培養細胞
          檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
      6. 組織標本
          切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

      人一氧化氮合成酶(NOS)elisa試劑盒   48次 1200元,96次,2200元,本公司提供免費代測服務,詳情請咨詢

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