苯丙氨酸檢測(cè)試劑盒（本公司可用Elisa法測(cè)定含量）

【產(chǎn)品名稱(chēng)】
    通用名稱(chēng)：苯丙氨酸檢測(cè)試劑盒（細(xì)菌抑制法）    英文名稱(chēng)： Phenylalanine Kit（BIA）

【包裝規(guī)格】    96人份/盒  

【預(yù)期用途】
    用于檢測(cè)采集在S&S 903# 濾紙上的新生兒血樣品中苯丙氨酸的含量。適用于新生兒苯丙酮尿癥（PKU）的篩查，僅用于體外檢測(cè)。
    苯丙酮尿癥（簡(jiǎn)稱(chēng)PKU）是一種較常見(jiàn)的常染色體隱性遺傳性氨基酸代謝病，發(fā)病率約1/10,000。本病可因苯丙氨酸羥化酶缺乏引起，也可因輔酶因子BH4缺陷引起。這些缺陷致使苯丙氨酸不能被轉(zhuǎn)化為酪氨酸，導(dǎo)致大量的苯丙氨酸及其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)堆積，引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害。其臨床主要表現(xiàn)為：發(fā)育遲緩，毛發(fā)、皮膚及虹膜變淺，癲癇，進(jìn)行性智力低下等。由于本病的早期發(fā)現(xiàn)早期治療，對(duì)患兒的生長(zhǎng)發(fā)育、智力發(fā)育不受影響，因此被我國(guó)列為新生兒疾病篩查項(xiàng)目之一。檢測(cè)方法還有熒光法、酶法等。 【檢驗(yàn)原理】
    枯草桿菌在含有抑制劑的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)受到抑制，而當(dāng)外界提供苯丙氨酸環(huán)境時(shí)，抑制作用解除，枯草桿菌即可恢復(fù)生長(zhǎng)且細(xì)菌生長(zhǎng)環(huán)的直徑與苯丙氨酸的含量呈正比。所以在制備好的培養(yǎng)基上，放上濾紙干血片，血中的苯丙氨酸會(huì)擴(kuò)散到周?chē)囵B(yǎng)基中，被抑制的枯草桿菌即可恢復(fù)生長(zhǎng)。用被檢樣品的菌環(huán)直徑與標(biāo)準(zhǔn)品的菌環(huán)直徑相比，得出樣品中苯丙氨酸的含量。 
 【主要組成成分】
    苯丙氨酸篩查試劑盒（細(xì)菌抑制法）組成表
名稱(chēng)
96人份/盒
包裝
瓊脂糖粉 （瓊脂粉、葡萄糖粉） 1.5g/瓶
無(wú)色透明玻璃瓶
營(yíng)養(yǎng)液（氨基酸、磷酸鹽緩沖液等）10ml/瓶
青霉素酶（青霉素酶、生理鹽水）0.3ml/瓶抑制劑（β-2-噻吩丙氨酸）1.0ml/瓶
菌株孢子懸液（枯草桿菌）0.2ml/瓶
一次性培養(yǎng)皿（透明聚苯乙烯）1塊
無(wú)色透明塑料袋
標(biāo)準(zhǔn)血片 2;4;8;20mg/dl(全血、苯丙氨酸)
1份
質(zhì)控血片C1、C2(全血、苯丙氨酸)1份

  說(shuō)明書(shū)1份

    注*：標(biāo)準(zhǔn)品或質(zhì)控品的濃度若有改變，將在試劑盒內(nèi)放通知單，同時(shí)通知。

 【儲(chǔ)存條件及有效期】
    儲(chǔ)存條件2℃～8℃,防止冷凍。
    有效期６個(gè)月，試劑盒開(kāi)啟后一次性使用。

【適用機(jī)型】
    無(wú)需儀器檢測(cè)。

【樣本要求】
    按照衛(wèi)生部規(guī)定的“新生兒采血常規(guī)"采取足跟血。

【檢驗(yàn)方法】
    1.瓊脂液配制：將瓊脂糖倒入三角燒瓶中，加入100ml雙蒸水（7日內(nèi)）加熱煮沸（建議沸騰三次）至*溶解，（燒瓶中放入一支溫度計(jì)監(jiān)控溫度）；
    2.混合液配制：將青霉素酶、抑制劑、菌株孢子懸液加入到營(yíng)養(yǎng)液瓶中，充分混勻備用；    3.當(dāng)瓊脂糖液的溫度降至55℃～60℃時(shí)，將混合液全部倒入瓊脂糖液中，充分混勻后（避免產(chǎn)生氣泡）快速倒入一次性培養(yǎng)皿中，使其成為厚薄均勻、平整光潔的薄層（厚度約３mm），待冷卻后備用；
    4.用直徑3mm打孔器分別打取標(biāo)準(zhǔn)血片、質(zhì)控血片和待檢血片，按照加樣模板所示排列在培養(yǎng)皿上，將培養(yǎng)皿倒置放入37±℃0.5℃恒溫箱中培養(yǎng)16-18小時(shí)；
    5.菌環(huán)量?。涸诰h(huán)zui致密處分別量取標(biāo)準(zhǔn)血片、質(zhì)控血片和待檢血片細(xì)菌生長(zhǎng)環(huán)的直徑，將待檢血片的細(xì)菌生長(zhǎng)環(huán)直徑與標(biāo)準(zhǔn)品相比較，可得出待檢血片的苯丙氨酸含量。   標(biāo)準(zhǔn)品菌環(huán)范圍：
    2 mg/dl時(shí)菌環(huán)直徑為 0.75-1.05cm；4 mg/dl時(shí)菌環(huán)直徑為 1.25-.155cm；    8 mg/dl時(shí)菌環(huán)直徑為 1.55-1.85cm；20 mg/dl時(shí)菌環(huán)直徑為2.05-2.35cm；  質(zhì)控品菌環(huán)范圍：
    陰性質(zhì)控菌環(huán)直徑應(yīng) ＜2mg/dl濃度點(diǎn)的直徑；    陽(yáng)性質(zhì)控菌環(huán)直徑應(yīng) ＞4mg/dl濃度點(diǎn)的直徑。 【參考值（參考范圍）】    參考值< 4mg/dl

【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
    1. 苯丙氨酸含量≥4mg/dl為可疑陽(yáng)性，原血片復(fù)查，苯丙氨酸含量仍≥4mg/dl，即召回復(fù)查；
    2. 檢測(cè)結(jié)果本身不能成為治療的惟一因素。必須與其他的臨床觀(guān)察和診斷試驗(yàn)相結(jié)合；    3. 質(zhì)控品的結(jié)果必須控制在試劑盒要求范圍之內(nèi)，否則實(shí)驗(yàn)結(jié)果可視為無(wú)效。 

【檢驗(yàn)方法的局限性】
    1.應(yīng)使用新生兒篩查S&S 903#濾紙采集血斑。使用其他濾紙結(jié)果將不同；    2.采血時(shí)間為出生后72小時(shí)，并充分哺乳6次以上，否則會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果。  

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
    1. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度范圍：2-20 mg/dl.；    2. 批內(nèi)精密度：CV不大于10 %

    3. 批間精密度：CV不大于12 %；    4. 準(zhǔn)確性：回收率為100～125％；    5. 靈敏度：小于1mg/dl.；
    6. 特異性：與酪氨酸、色氨酸無(wú)交叉反應(yīng)。

【注意事項(xiàng)】
    1. 本試劑盒為一次性使用產(chǎn)品；不同批號(hào)試劑不可混用；超出效期不可使用；僅用于體外檢測(cè)；      
    2.．所有試劑、樣本應(yīng)視為有潛在的傳染源，實(shí)驗(yàn)結(jié)束應(yīng)采用高壓或消毒液浸泡處理。  

【參考文獻(xiàn)】
   上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司技術(shù)部資料分析