ＥＬＩＳＡ試劑盒　ＥＬＩＳＡ檢測試劑盒　ＥＬＩＳＡ　ＫＩＴ

產(chǎn)品名稱：大鼠胰島素自身抗體

英文名稱：Rat insulin autoantibodies,IAA ELISA KIT

使用范圍：科研
產(chǎn)品規(guī)格：96人份/48人份
各種種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標本齊全：血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔溢液等…
經(jīng)營品牌:美國ＲＤ　ＲＢ　ＩＢＬ
保存條件：2-8℃
有效期：６個月
運輸條件：低溫運輸，用干冰或者冰袋低溫運輸。

大鼠胰島素自身抗體 ELISA技術(shù)操作要點，抗原和抗體
在ELISA實施過程中，抗原和抗體的質(zhì)量是實驗是否成功的關(guān)鍵因素。本法要求所用抗原純度高，抗體效價高、親和力強。
ELISA所用抗原有三個來源：天然抗原、重組抗原和合成多肽抗原。天然抗原取材于動物組織或體液、微生物培養(yǎng)物等，一般含有多種抗原成分，需經(jīng)純化，提取出特定的抗原成分后才可應(yīng)用，因此也稱提純抗原（purifiedantigen）。重組抗原（recombinantantigen）和多肽抗原（peptideantigen）均為人工合成品，使用安全，而且純度高，干擾物質(zhì)少。因此雖然制備合成抗原有較高的技術(shù)難度且要求較為昂貴的儀器設(shè)備和試劑，其應(yīng)用仍十分普遍，特別是對那些天然抗原不易得到的試驗，更顯出其獨到之處。
用于ELISA的抗體有多克隆的和單克隆的。抗血清成分復(fù)雜，應(yīng)從中提取IgG才可用于包被固相或酶標記。含單克隆抗體的小鼠腹水中的特異性抗體含量較高，有時可適當(dāng)稀釋后直接進行包被。制備酶結(jié)合物用的抗體的質(zhì)量往往要求有較高的純度。經(jīng)硫酸銨鹽析純化的IgG可進一步用各種分子篩層析提純。也可用親和層析法提純特異性IgG，如用酶消化IgG后提取的Fab片段，則效果更好。
ELISA技術(shù)操作要點，酶和底物
ELISA中所用的酶要求純度高、催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高、專一性強、性質(zhì)穩(wěn)定、來源豐富、價格不貴、制備成的酶標抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)定，繼續(xù)保留著它的活性部分和催化能力。在受檢標本中不存在與標記酶相同的酶。另外它的相應(yīng)底物應(yīng)易于制備和保存，價格低廉，有色產(chǎn)物易于測定，光吸收高。ELISA中zui常用的酶為辣根過氧化酶（HRP）和從牛腸粘膜或大腸桿菌提取的堿性磷酸酶（AP）。
HRP在蔬菜作物辣根中含量很高，純化方法也不復(fù)雜。它是一種糖蛋白，含糖量約18％；分子量為44kD；是一種復(fù)合酶，由主酶（酶蛋白）和輔基（亞鐵血紅素）結(jié)合而成的一種卟啉蛋白質(zhì)。主酶為無色糖蛋白，在275nm波長處有zui高吸收峰；輔基是深棕色的含鐵卟啉環(huán)，在403nm波長處有zui高吸收峰。